產(chǎn)品名稱和規(guī)格：

貨號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	價格（元）
SC-Z001-20	pcDNA3.1(+)線性化載體	20μl/20T	880.00

產(chǎn)品介紹：

pcDNA3.1(+)是源自pcDNA3的5.4kb載體，專為在哺乳動物宿主中高水平穩(wěn)定和瞬時表達(dá)而設(shè)計。在大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞中可以進(jìn)行高水平的穩(wěn)定和非復(fù)制性瞬時表達(dá)。載體包含以下元件：人巨細(xì)胞病毒即刻早期（CMV）啟動子在多種哺乳動物細(xì)胞中高水平表達(dá)；用于篩選穩(wěn)定細(xì)胞系的新霉素抗性基因等。

基因克隆方法應(yīng)用廣泛的有酶切連接克隆和無縫克隆，酶切連接克隆的載體制備對于新手來說比較麻煩，需要準(zhǔn)備載體以及PCR產(chǎn)物還需要進(jìn)行酶切和回收等多個步驟。無縫克隆只要準(zhǔn)備好載體，PCR產(chǎn)物回收后可以直接用于連接，大大縮短試驗時間。

使用方法：

1、本產(chǎn)品是將pcDNA3.1（+）載體用BamHI和XhoI雙酶切后，回收的線性化載體。

2、無縫克隆引物設(shè)計方法，當(dāng)做克隆載體使用，可以在擴(kuò)增PCR產(chǎn)物的：

（1）上游引物5’端添加序列：TTAAGCTTGGTACCGAGCTCGGATCCACCATG。（其中劃線部分為載體上的序列，CCACCATG為KOZAK序列，ATG為翻譯起始位置，注意不要移碼。）

（2）下游引物5’端添加序列：TAAACGGGCCCTCTAGACTCGAGTCA。（其中劃線部分為載體上的反向序列，TCA為終止密碼子）。

3、測序引物

（1）上游引物T7：TAATACGACTCACTATAGG

（2）下游引物BGH：TAGAAGGCACAGTCGAGG